Η αριστερή πλευρά της αίθουσας κλείνει με ευρήματα από το ιερό και το θέατρο του Διονύσου, θεού της βλάστησης και του κρασιού. Το ιερό ιδρύεται στη νότια πλαγιά της Ακρόπολης μετά τα μέσα του 6ου αι. π.Χ. Είναι το σημαντικότερο ιερό του θεού στην Αθήνα και εδώ γιορτάζονται τα Μεγάλα ή εν Άστει Διονύσια, η λαμπρότερη γιορτή προς τιμή του θεού. Από τα λατρευτικά δρώμενα, που αναπαριστούν τη ζωή και τα πάθη του Διονύσου, γεννιέται το δράμα, η καθιέρωση δραματικών διαγωνισμών και τελικά η τέχνη του θεάτρου. 

Το θέατρο του Διονύσου, το αρχαιότερο του κόσμου, βρίσκεται στην πλαγιά πάνω από το ιερό. Στην τελική μορφή του χωράει 16.000 θεατές. Εδώ τελειοποιούνται οι τρεις μορφές του αρχαίου δράματος -η τραγωδία, το σατυρικό δράμα και η κωμωδία- και εδώ παίζονται για πρώτη φορά τα έργα των σημαντικότερων αρχαίων τραγικών και κωμικών ποιητών: του Αισχύλου, του Σοφοκλή, του Ευριπίδη και του Αριστοφάνη.